Este equipamiento discurre dentro de Los Pinares de Aznalcázar- Puebla del Río, en el entorno natural del Parque Natural Doñana, utilizando las pistas forestales y vías pecuarias que atraviesan los pinares. El carril cicloturista posee una longitud de 22 kilómetros, comienza en la casa forestal Dehesa Nueva, continúa por la vía pecuaria Cordel de los Playeros para adentrarse en la masa de pinares con matorral de jaras, coscojas, jaguarzo blanco y lentisco. El último tramo discurre por la Cañada Real de los Isleños, rodeados por dehesas de encinas y plantaciones de árboles frutales. La mayor parte del carril es llana, con algunos repechos de dificultad baja. El inconveniente principal que se puede encontrar es la acumulación de arena en algunos tramos.